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NEWS基质胶应用技巧揭秘 - 尊龙凯时生物医疗解析
来源:季松泰 日期:2025-07-25基质胶在3D细胞培养、类器官、肿瘤形成、细胞侵袭和血管生成等实验中扮演着重要的“支架”角色。然而,从解冻、铺板、浓度选择,到结果解读,每一个环节都稍有不慎可能导致实验失误。基于上万次实验反馈,尊龙凯时整理了这份“避坑指南”,帮助您顺利上手,获取高质量的数据。
收到尊龙凯时的基质胶后,如何进行保存?建议将产品置于-20℃环境中存放;如果需要短时间放置,可在4℃下保存不超过7天。关于反复冻融,尊龙凯时不建议进行;首次解冻后应立即分装(200µL/管)并存储于-20℃。对于解冻步骤,可以将冷冻的基质胶在操作前一天放入碎冰中,随后转移到4℃冰箱,次日即可使用。适当延长4℃下的融化时间,有助于减少基质胶中的气泡。
含酚红基质胶适用于常规实验,因其在不同温度和pH下会显示出明黄色到暗红色的变化;而无酚红基质胶则更适合颜色检测相关的实验,尤其在子宫内膜细胞培养中,必须使用不含酚红的基质胶。此外,含酚红的基质胶可能对实验动物的内分泌产生干扰,影响激素的自然生成和代谢能力。
标准浓度的蛋白浓度为8-12mg/mL,适用于Transwell实验和皮下成瘤实验;而高浓度的蛋白(18-22mg/mL)适合用于难以成瘤的细胞系。对于类器官培养和血管生成实验,基于标准浓度基质胶减生长因子的处理也具有良好的效果。
可能的原因包括:1) 细胞处于对数生长期,密度应为80-90%;2) 鼠龄建议选择4-6周龄的裸鼠,过小或过大都可能影响成瘤能力;3) 如果出现免疫排斥,建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠;4) 若肿瘤消失,可能是炎症反应导致。
在细胞不能形成连续的网格时,建议使用3-5代且融合度70%-80%的HUVEC细胞,确保细胞数量充足,可在4-18小时内观察到血管生成的效果。
细胞活性不足可能是导致侵袭能力较弱的原因。使用胰酶消化后,务必洗去含血清的培养基,以确保实验成功率。
不同类器官的传代时间标准不同,通常为7-14日,直径达到100-200µm时可进行传代,有些发育较慢的类器官可能需要数周时间。鉴定类器官的方法包括显微镜观察和H&E染色,进一步可通过免疫荧光检测类器官是否表达相应的生物标志物。若观察的形态与文献不符,可能是样本来源或细胞因子差异造成的。
尊龙凯时提供多种规格的基质胶,包括:
通过选择合适的基质胶,您可以大大提升实验的成功率和数据的可靠性,尊龙凯时期待与您共同探索生物医学的无尽可能。
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